PĀRBAUDES KOPSAVILKUMS UN SKAIDROJUMS
Malārija ir odu pārnēsāta, hemolītiska, febrila slimība, kas inficē vairāk nekā 200 miljonus cilvēku un nogalina vairāk nekā 1 miljonu cilvēku gadā.To izraisa četras Plasmodium sugas: P. falciparum, P. vivax, P. ovale un P. malariae.Visas šīs plazmodijas inficē un iznīcina cilvēka eritrocītus, izraisot drebuļus, drudzi, anēmiju un splenomegāliju.P. falciparum izraisa smagākas slimības nekā citas plazmodijas sugas un izraisa lielāko daļu malārijas nāves gadījumu.P. falciparum un P. vivax ir visizplatītākie patogēni, tomēr sugu izplatībā ir ievērojamas ģeogrāfiskas atšķirības.
Tradicionāli malāriju diagnosticē, demonstrējot organismus uz Giemsa iekrāsotām biezām perifēro asiņu uztriepēm, un dažādas plazmodija sugas izceļas ar to parādīšanos inficētos eritrocītos1.Šis paņēmiens spēj veikt precīzu un uzticamu diagnostiku, bet tikai tad, ja to veic kvalificēti mikroskopi, izmantojot noteiktus protokolus2, kas rada lielus šķēršļus attālajiem un nabadzīgajiem pasaules apgabaliem.
Malaria Pf / Pan Antigen Rapid Test Kit ir izstrādāts šo šķēršļu risināšanai.Testā izmanto monoklonālo un poliklonālo antivielu pāri pret P. falciparum specifisko proteīnu, Histidine Repeat Protein II (pHRP-II) un monoklonālo antivielu pāri pret plazmodija laktāta dehidrogenāzi (pLDH), proteīnu, ko ražo četras plazmodija sugas, tādējādi ļaujot identificēt un simulēt jebkuru citu P. falciparum infekciju. plazmodija.To var veikt neapmācīts vai minimāli kvalificēts personāls, bez laboratorijas aprīkojuma.
PRINCIPS
Pf/Pan Malaria Rapid Test komplekts ir sānu plūsmas hromatogrāfijas imūntests.Testa sloksnes sastāvdaļas sastāv no: 1) bordo krāsas konjugāta spilventiņa, kas satur peles anti-pHRP-II antivielu, kas konjugēta ar koloidālo zeltu (pHRP II-zelta konjugāti) un peles anti-pLDH antivielu, kas konjugēta ar koloidālo zeltu (pLDH-zelta konjugāti),
2) nitrocelulozes membrānas sloksne, kas satur divas testa joslas (Pan un Pv joslas) un kontroles joslu (C josla).Pan josla ir iepriekš pārklāta ar monoklonālu anti-pLDH antivielu, ar kuru var noteikt infekciju ar jebkuru no četrām plazmodiju sugām, Pf josla ir iepriekš pārklāta ar poliklonālām anti-pHRP-II antivielām Pf infekcijas noteikšanai, un C josla ir pārklāta ar kazas anti-peles IgG.
Testa laikā testējamās kasetes parauga iedobē (S) tiek ievadīts atbilstošs asins parauga tilpums, bufera iedobei (B) pievieno līzes buferšķīdumu.Buferis satur mazgāšanas līdzekli, kas lizē sarkanās asins šūnas un atbrīvo dažādus plazmodija antigēnus, kas migrē ar kapilāru darbību pa kasetē esošo sloksni.pHRP-II, ja tas atrodas paraugā, saistās ar pHRP II-zelta konjugātiem.Pēc tam imūnkomplekss tiek uztverts uz membrānas ar iepriekš pārklātām anti-pHRPII antivielām, veidojot bordo krāsas Pf joslu, kas norāda uz Pf pozitīvu testa rezultātu.Ja pLDH ir paraugā, tas saistās ar pLDH zelta konjugātiem.Pēc tam imūnkomplekss tiek uztverts uz membrānas ar iepriekš pārklātu anti-pLDH antivielu, veidojot bordo krāsas Pan joslu, kas norāda uz plazmodija pozitīvu testa rezultātu.Ja Pan joslas nav, var ieteikt pozitīvu testa rezultātu jebkurai no pārējām trim plazmodijām.
Testa joslu trūkums (Pan un Pf) liecina par negatīvu rezultātu.Pārbaudē ir iekļauta iekšējā kontrole (C josla), kurai vajadzētu parādīt bordo krāsas joslu no kazas anti-peles IgG/peles IgG imūnkompleksa (pHRP-II un pLDH-zelta konjugāti) neatkarīgi no krāsas attīstības jebkurā no testa joslām.Pretējā gadījumā testa rezultāts ir nederīgs un paraugs ir atkārtoti jāpārbauda ar citu ierīci.
