PĀRBAUDES KOPSAVILKUMS UN SKAIDROJUMS
Malārija ir odu pārnēsāta, hemolītiska, febrila slimība, kas inficē vairāk nekā 200 miljonus cilvēku un nogalina vairāk nekā 1 miljonu cilvēku gadā.To izraisa četras Plasmodium sugas: P. falciparum, P. vivax, P. ovale un P. malariae.Visas šīs plazmodijas inficē un iznīcina cilvēka eritrocītus, izraisot drebuļus, drudzi, anēmiju un splenomegāliju.P. falciparum izraisa smagākas slimības nekā citas plazmodijas sugas un izraisa lielāko daļu malārijas nāves gadījumu.P. falciparum un P. vivax ir visizplatītākie patogēni, tomēr sugu izplatībā ir ievērojamas ģeogrāfiskas atšķirības.
Tradicionāli malāriju diagnosticē, demonstrējot organismus uz Giemsa iekrāsotām biezām perifēro asiņu uztriepēm, un dažādas plazmodija sugas izceļas ar to parādīšanos inficētos eritrocītos.Šis paņēmiens spēj veikt precīzu un uzticamu diagnostiku, bet tikai tad, ja to veic kvalificēti mikroskopi, izmantojot noteiktus protokolus, kas rada lielus šķēršļus attālajiem un nabadzīgajiem pasaules apgabaliem.
Malārijas Pf/Pv Ag Rapid Test ir izstrādāts šo šķēršļu risināšanai.Tas izmanto antivielas, kas raksturīgas P. falciparum Histidine Rich Protein-II (pHRP-II) un P. vivax laktātdehidrogenāzei (Pv-LDH), lai vienlaikus noteiktu un diferencētu infekciju ar P. falciparum un P. vivax.Pārbaudi var veikt neapmācīts vai minimāli kvalificēts personāls, bez laboratorijas aprīkojuma
PRINCIPS
Malārijas Pf/Pv Ag ātrais tests ir sānu plūsmas hromatogrāfijas imūntests.Testa sloksnes sastāvdaļas sastāv no: 1) bordo krāsas konjugāta spilventiņa, kas satur peles anti-Pv-LDH antivielu, kas konjugēta ar koloidālo zeltu (Pv-LDH-zelta konjugāti) un peles anti-pHRP-II antivielu, kas konjugēta ar koloidālo zeltu (pHRP-II-zelta konjugāti), 2) kontroles membrānu (P joslu un celulozes joslu, kas satur nitro) josla).Pv josla ir iepriekš pārklāta ar citu peles anti-Pv-LDH specifisku antivielu Pv infekcijas noteikšanai, Pf josla ir iepriekš pārklāta ar poliklonālām anti-pHRP-II antivielām Pf infekcijas noteikšanai, un C josla ir pārklāta ar kazas anti-peles IgG.
Testa laikā testējamās kasetes parauga iedobē (S) tiek ievadīts atbilstošs asins parauga tilpums, bufera iedobei (B) pievieno līzes buferšķīdumu.Buferis satur mazgāšanas līdzekli, kas lizē sarkanās asins šūnas un atbrīvo dažādus antigēnus, kas kapilārās darbības rezultātā migrē pa kasetē ievietoto sloksni.Pv-LDH, ja tas atrodas paraugā, saistās ar Pv-LDH-zelta konjugātiem.Pēc tam imūnkomplekss tiek uztverts uz membrānas ar iepriekš pārklātu anti-Pv-LDH antivielu, veidojot bordo krāsas Pv joslu, kas norāda uz Pv pozitīvu testa rezultātu.Alternatīvi, pHRP-II, ja tas atrodas paraugā, saistās ar pHRP-II-zelta konjugātiem.Pēc tam imūnkomplekss tiek uztverts uz membrānas ar iepriekš pārklātām anti-pHRP-II antivielām, veidojot bordo krāsas Pf joslu, kas norāda uz Pf pozitīvu testa rezultātu.Testa joslu trūkums liecina par negatīvu rezultātu.Pārbaudē ir iekļauta iekšējā kontrole (C josla), kurai vajadzētu parādīt bordo krāsas joslu no kazas anti-peles IgG/peles IgG (anti-Pv-LDH un anti-pHRPII)-zelta konjugātu imūnkompleksa neatkarīgi no krāsas attīstības jebkurā no testa joslām.Pretējā gadījumā testa rezultāts ir nederīgs un paraugs ir atkārtoti jāpārbauda ar citu ierīci.
